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虽然它们也是雌性，但因为在幼虫时期只吃过3天蜂王浆，造成生殖器官发育不完善，不能与雄蜂交配，所以不能产卵繁殖后代。当个别蜂群失去蜂王时，个别工蜂卵巢恢复发育，但产的卵为没有受精的卵，将来成为雄蜂，时间一长，整个蜂群就毁灭了
工蜂在这个群体中数量最多。蜂王与雄蜂交配后，它的卵子与雄蜂的精子结合成为受精卵，由受精卵所孵化的幼蜂都是雌性的。这些雌性幼蜂一般前三天喂以蜂王浆，以后喂以蜂蜜，故长大后就变成工蜂。
工蜂是蜜蜂王国里工作生活最为辛劳的个体，儿歌唱的“小蜜蜂，整天忙，采花蜜，酿蜜糖”、“小蜜蜂，嗡嗡嗡，飞到西来飞到东”，指的就是工蜂。工蜂担任蜂群中一切工作，除采粉、采蜜和酿蜜外，还负责清洁蜂巢、筑巢、分泌蜂王浆、饲喂幼虫和保卫蜂群等各项工作。一个蜂群中保持的工蜂多少，因不同季节而异，一般为2万到5万只。
工蜂的寿命，夏季4-6周，冬季3-6月，其寿命的长短与工作强度、蜂群群势有很大的关系。它们每时每刻都在辛勤地工作。尤其在繁殖季节和外界蜜源植物盛花期（春末夏初之际），更为忙碌，寿命极为短暂。在它们出世后的第1天至第3天，就当上了“清洁工”，负责把蜂巢里面打扫得千干净净。第4天和第5天则成为“保姆”，负责用花粉与花蜜喂养幼蜂。从第6天到第12天，它们又改当“佣人”，负责分泌蜂王浆来伺候蜂王。第13天到第17天，它们充当“建筑工”的角色，负责分泌蜂蜡建造蜂巢，另外还要把花蜜加以浓缩及把花粉捣碎，以便酿造蜂蜜。第18天到第20天，它们到了成年时候，开始从事繁忙的采集工作。当它们劳累到全身绒毛掉光，体色变黑的老年蜂，又成为蜂群的“卫士”，负责保卫蜂巢的安全。虽然它们也是雌性，但因为在幼虫时期只吃过3天蜂王浆，造成生殖器官发育不完善，不能与雄蜂交配，所以不能产卵繁殖后代。当个别蜂群失去蜂王时，个别工蜂卵巢恢复发育，但产的卵为没有受精的卵，将来成为雄蜂，时间一长，整个蜂群就毁灭了。
工蜂采集花蜜的工作极为繁重，因为每1千克的蜂蜜，需要采集10千克的花蜜才能酿造出来，而为了采集到10千克花蜜，需要一只工蜂出动8万次，每次飞行2000多米才能完成。也就是说，为了酿造0.5千克的蜂蜜，一只工蜂必须飞行16万公里，这个距离相当于绕地球4圈的路程。
